۱-۱۰-۱) نوع روش تحقیق
با توجه به اینکه پژوهش حاضر از فصول مختلفی تشکیل شده است لذا روش تحقیق نسبت به فصول با روند مطالعاتی- تحلیلی به تجزیه و تحلیل و تلفیق اطلاعات پرداخته است و در نهایت جمعبندی حاصله را در طرحی استفاده نموده است.
برای بخش مبانی نظری از شیوه های تحلیلی-توصیفی و برای بخش طراحی معماری از شیوه مطالعات میدانی و پیمایشی استفاده شده است.
۱-۱۰-۲) روش گرد آوری اطلاعات
کتابخانهای- میدانی
در بخش کتابخانهای با مراجعه به کتابها، نشریات، پایان نامهها و دیگر ابزارهای مرتبط به موضوع به گردآوری اطلاعات پرداخته شده است.
جمعآوری اطلاعات میدانی نیز با مراجعه به محل و تکمیل اطلاعات پایه صورت گرفته است.
۱-۱۰-۳) ابزار گردآوری اطلاعات
- کتابها و نشریات، پایان نامههای مرتبط با موضوع، اینترنت
- حضور در محل، مصاحبه و مشاهدات عینی و عکاسی و …
۱-۱۰-۴) روش تجزیه و تحلیل اطلاعات
- انتخاب سایت مورد نظر و بررسی دسترسیهای منطقه در ارتباط با طرح
- گرداوری داده های لازم در مورد سایت و بررسی نیازها و مشکلات آن
- مطالعات اقلیمی سایت
- تجزیه و تحلیل ویژگیهای کالبدی سایت جهت طراحی
- استخراج برنامه فیزیکی طرح با توجه به نیازهای خاص منطقه
- بررسی و مطالعه کامل نمونههای موردی و گردآوری شده
- تدوین آلترناتیوهای طراحی با توجه به نمونهها و اهداف طرح با ساخت ماکتهای اتود و ترسیمات مختلف طراحی
- تدوین طرح نهایی و ترسیم احجام و نقشههای مربوطه طرح
- در نهایت ارائه طرح نهایی با بهره گرفتن از نرم افزارهای Auto Cad، ۳d Max، V-ray، Photoshop Word,.
s
شکل(۱۰-۱۶): پوستر«یک»
شکل(۱۰-۱۷): پوستر«دو»
شکل(۱۰-۱۸): پوستر«سه»
فهرست منابع
منابع فارسی
آراسته، حمیدرضا، عبدالرحیم نوهابراهیم و علیرضا مطلبیفرد، ۱۳۸۸و۱۳۸۹، بررسی وضعیت اخلاق آموزشی اعضای هیئت علمی دانشگاه های دولتی شهر تهران، نشریه راهبرد فرهنگ، شماره۸و۹: ۲۰۳-۲۱۹.
آزاد، اسدلله، ۱۳۸۱، دایره المعارف کتابداری و اطلاعرسانی، جلد۱، ویراستار دکتر عباس حری، تهران: کتابخانه ملی جمهوری اسلامی ایران.
آهنگرسرویس، فائقه، ۱۳۹۰، طراحی مرکز تحقیقات تکنولوژی معماری با رویکرد انطباقپذیری با شرایط محیطی و عملکردی، پایان نامه کارشناسی ارشد معماری، استاد راهنما: مازیار آصفی، تبریز، دانشگاه هنر اسلامی تبریز.
آیتاللهی، حبیبالله، ۱۳۹۱، مقاله «مروری بر تاریخ نگارگری ایرانی-اسلامی»، در کتاب «جستارهایی در چیستی هنر اسلامی(مجموعه مقالات و درستگفتارها)»، چاپ چهارم، تهران: مؤسسه تألیف، ترجمه و نشر آثار هنری«متن»، ص۲۵-۳۴.
ایزوتسو، توشیهیکو، ۱۳۶۰، ساختمان معنایی مفاهیم اخلاقی-دینی در قرآن، ترجمه: فریدون بدرهای، انتشارات قلم.
ابراهیمیدینانی، غلامحسین، ۱۳۹۱، مقاله «رویکرد حکمت اشراق به هنر اسلامی»، در کتاب «جستارهایی در چیستی هنر اسلامی(مجموعه مقالات و درستگفتارها)»، چاپ چهارم، تهران: مؤسسه تألیف، ترجمه و نشر آثار هنری«متن»، ص۸۲-۹۳.
ابوالقاسمی، لطیف، ۱۳۷۴، معماری ایران در سخن چهار نسل از معماران صاحبنظر، مجله آبادی، شماره۱۹: ۴-۴۶
اتینگهاوزن، ریچارد و الگ گربار، ۱۳۷۸، هنر و معماری اسلامی، ترجمه: یعقوب آژند، چاپ اول، تهران: انتشارات سمت.
احمدی، خدابخش و همکاران، ۱۳۸۹، بررسی میزان شناخت مشاوران و روانشناسان از اصول اخلاق حرفهای، نشریه تازهها و پژوهشهای مشاوره، جلد۹، شماره۳۴: ۴۹-۶۷.
اردلان، نادر و لاله بختیار، ۱۳۸۰، حس وحدت(سنت عرفانی در معماری ایرانی)، ترجمه: حمید شاهرخ، اصفهان: نشر خاک.
اعوانی، غلامرضا، ۱۳۷۵، حکمت و هنر معنوی(مجموعه مقالات)، تهران: انتشارات گروس.
اقبال، عباس، ۱۳۷۸، تاریخ مغول، تهران: امیرکبیر.
اکبری، فاطمه و همکاران، ۱۳۸۹، معرفت روحانی و رمزهای هندسی، نشریه علمی پژوهشی پژوهشنامه زبان و ادب فارسی(گوهر گویا)، سال چهارم، شماره۱، پیاپی۱۳: ۱-۲۲.
اکرمی، غلامرضا، ۱۳۸۲، تعریف معماری گام اول آموزش(چالشها و تناقضات)، نشریه هنرهای زیبا، شماره۱۶: ۳۳-۴۸.
البوزجانی، ابوالوفا محمدبنمحمد، ۱۳۷۶، هندسه ایرانی(کاربرد هندسه در عمل)، ترجمه: علیرضا جذبی، تهران: انتشارات سروش.
الاسعد، محمد، ۱۳۷۶، کاربردهای هندسه در معماری مساجد، ترجمه: سعید سعیدپور، فصلنامه هنر، شماره۳۳: ۳۴-۵۳.
السعید، عصام و عایشه پارمان، ۱۳۷۷، نقشهای هندسی در هنر اسلامی، ترجمه: مسعود رجبنیا، چاپ دوم، تهران: انتشارات سروش.
امامیجمعه، سیدمهدی، ۱۳۹۱، مقاله «رویکرد حکمت متعالیه به هنر اسلامی»، در کتاب «جستارهایی در چیستی هنر اسلامی(مجموعه مقالات و درستگفتارها)»، چاپ چهارم، تهران: مؤسسه تألیف، ترجمه و نشر آثار هنری«متن»، ص۹۵-۱۲۸.
امیرکبیری، علیرضا و سهیلا داروئیان، ۱۳۹۰، برداشتهای اخلاق حرفهای مدیران در کسب و کارهای کوچک و متوسط، فصلنامه اخلاق در علوم و فناوری، سال ششم، شماره۱: ۸۴-۹۴.
انصاریان، حسین، ۱۳۸۲، زیباییهای اخلاقی، قم: انتشارات دارالعرفان.
انوری، حسن، ۱۳۸۱، فرهنگ بزرگ سخن، چاپ اول، جلد اول، تهران: انتشارات سخن.
انوری، حسن، ۱۳۸۲، فرهنگ بزرگ سخن، چاپ دوم، جلد هشتم، تهران: انتشارات سخن.
بانیمسعود، امیر، ۱۳۸۸، معماری معاصر ایران در تکاپوی بین سنت و مدرنیته، چاپ اول، تهران: نشر هنر معماری قرن.
بحرینی، نسرین، ۱۳۸۹، مقاله «مبانی اخلاقی آزمونسازی در نظام آموزشی ایران»، در کتاب «اخلاق کاربردی در ایران و اسلام»، به اهتمام: احدفرامرز قراملکی، تهران: پژوهشکده مطالعات فرهنگی و اجتماعی، صص۷۳-۹۷.
بروک، اریک، ۱۳۸۷، نقوش هندسی اسلامی، ترجمه: بهروز زبیحیان، تهران: انتشارات مازیار.
بزرگمهری، زهره، ۱۳۷۱، هندسه در معماری، تهران: انتشارات سازمان میراث فرهنگی.
بلخاریقهی، حسن، ۱۳۹۰، هویت معنایی و معنوی معماری، نشریه اطلاعات (حکمت و معرفت)، شماره۶۹: ۱۳-۲۰.
بلخاریقهی، حسن، ۱۳۸۸، مبانی عرفانی هنر و معماری اسلامی. چاپ اول. تهران: سازمان تبلیغات اسلامی، حوزه هنری سوره مهر.
بلخاریقهی، حسن، ۱۳۸۴، جایگاه کیهانشناختی دایره و مربع در معماری مقدس (اسلامی)، نشریه هنرهای زیبا، شماره۲۴: ۵-۱۴.
بلوم، جاناتان و دیگران، ۱۳۸۹، تجلی معنا در هنر اسلامی، ترجمه: اکرم قیطاسی، چاپ اول، تهران: انتشارات سوره مهر.
گاهی اوقات شرایط موجود در سازمان به گونه ای است که کارکنان و مدیر هر یک توانایی و انگیزه تغییر را در حیطه کاری خود نمی بینند. به این منظور می توان از روش های گوناگون و همچنینی اصلاحات مختلفی به منظور بهتر شدن شرایط به شرح ذیل وجود دارد:
استفاده از ساختار سازمانی غیر متمرکز از طریق واگذاری اختیار مورد نیاز به زیر دستان ، به منظور تقویت نمودن شرایط ایجاد نوآوری و تغییر در سازمان.
هماهنگی واحدهای افقی بین واحدهای مختلف درون یک سازمان به منظور دستیابی سازمان به توانایی در ایجاد تغییر.
استفاده از تکنیک طوفان مغزی از طریق گروهی می کوشند راه حلی برای یک مسئله بخصوص با انباشتن تمام ایده هایی که در جا به وسیله اعضا ارائه می گردد بیابند.
استفاده از تکنیک گروه اسمی که در آن از طریق امتیازدهی به نظرات مطرح شده در گروه بهترین ایده انتخاب و تغییر مورد نیاز حاصل می شود.
استفاده از روش گردش تخیلی که از طریق آن ، گروههای ایجاد خلاقیت، اعضای گروه را از طریق بکارگیری یک جریان تمثیلی و استعارهای به گردشی تخیلی ترغیب مینمایند و در این حالت ایدهها و نظرات بدیعی را کشف میکنند.
استفاده از روش تفکر موازی. دانشمندان روش معمول تفکر را همانند حفر گودالی توصیف میکنند که با افزایش اطلاعات فرد همان گودال را عمیق تر میسازد و از دیدن جاهای دیگر برای حفر کردن باز میماند؛ در حالی که تفکر موازی نگاه فرد را به نقاط جدید معطوف میسازد و اطلاعات و تجربههای جدید صرفاً به اندیشههای قبلی افزوده نمیشود، بلکه آنها را تغییر داده و الگو و ساختار جدیدی را ایجاد میکند.
۵-۶- پیشنهادهایی برای پژوهشگران آینده
در حال حاضر با بررسی های صورت گرفته ، خلاء های ناشی از عدم انجام تحقیقات پیرامون سبک های تفکر بر اساس رویکرد شناختی در بین مدیران ، کارکنان و نیز افراد جامعه ، در منابع فارسی به وضوح دیده می شود و کمتر کسی به پژوهش در این زمینه پرداخته است . بنابراین در بحث پیشنهادهای پژوهشی برای پژوهشگران آینده ، موضوعاتی در ارتباط با این مفهوم ارائه داده می شود.
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با هوش عاطفی؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با مهارت های مدیران موثر ؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با الگوهای رفتاری آنان؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با میزان سیاسی بودن سازمان؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با عملکرد مالی سازمان؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با ارزیابی عملکرد در سازمان های خصوصی ؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با جو سازمانی حاکم بر دانشگاه ها و مراکز آموزش عالی در استان های دیگر ؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با هوش معنوی آنان ؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با عدالت سازمانی ؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر کارکنان با یادگیری سازمانی ؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با سکوت سازمانی؛
بررسی ارتباط میان سبک تفکر مدیران با تمایل به ترک خدمت کارکنان در شرکت های خصوصی.
۵-۷- مشکلات و محدودیت های تحقیق
ارائه اطلاعات و آمارهای بعضاً نادرست و غیرواقعی از جانب برخی از مدیران و معاونان
همکاری ضعیف برخی از دانشگاه ها و مراکز آموزش و عالی
منابع لاتین ، فارسی و کتابخانه ای اندک در مورد سبک تفکر و تحقیقات اندک انجام شده در این زمینه
سختی ارتباط با مدیران و موافقت آنان در ایجاد مساعدت برای همکاری در رسیدن به نتایج مورد نظر
صرف زمان زیاد برای توزیع پرسشنامه ها و جمع آوری پرسشنامه های تکمیل شده در دانشگاه ها
صرف زمان زیاد برای توجیه محتوا و هدف از تحقیق برای معاونان و مدیرا
فهرست منابع :
الف)منابع فارسی:
استرنبرگ، رابرت ج. (۱۹۹۹) . “سبک های تفکر“. ترجمه : علاء الدین اعتماد اهری و علی اکبر خسروی (۱۳۸۱)، تهران: نشر و پژوهش دادار.
امامی پور،سوزان (۱۳۸۰). “بررسی تحولی سبک های تفکر در دانش آموزان و دانشجویان و رابطه آن با خلاقیت و پیشرفت تحصیلی“. رساله دکتری . دانشکده علوم انسانی و اجتماعی دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم تحقیقات .
امیرخانی، ژاله (۱۳۸۱). “ بررسی رابطه بین سبک های تفکر معلمان و دانش آموزان و تأثیر آن بر پیشرفت تحصیلی دانش آموزان” . پایان نامه کارشناسی ارشد. دانشکده روانشناسی و علوم اجتماعی دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران مرکزی .
امیدوار ، بنفشه و حسین چاری ، مسعود (۱۳۸۸). “بررسی رابطه سبک های تفکر و راهبردهای مقابله با استرس در دانشجویان دانشگاه شیراز“. مجموعه مقالات چهارمین سمینار سراسری بهداشت روانی دانشجویان، صص ۵۳-۵۱.
ایران نژاد پاریزی، مهدی(۱۳۷۸).” روش های تحقیق در علوم اجتماعی“. چاپ اول ،تهران: انتشارات مدیران.
بست، جان ( ۱۳۷۱ )." روش های تحقیق در علوم تربیتی و رفتاری“. ترجمه : حسن پاشا شریفی و نرگس طالقانی، چاپ اول، تهران:انتشارات آرین.
حسین زاده،امید (۱۳۸۴). “رابطه کارآفرینی مدیران و جوسازمانی با عملکرد دبیران مدارس متوسطه شهر اهواز” . ﭘایان نامه کارشناسی ارشد . دانشکده علوم انسانی دانشگاه شهید چمران اهواز .
حیدری، اسماعیل (۱۳۸۵). “ بررسی و مقایسۀ وضعیت مدارس دولتی و غیرانتفاعی (مقطع متوسطه) شهر زاهدان بر اساس اصول سازمانهای یادگیرنده“. پایان نامه کارشناسی ارشد. دانشکده اقتصاد و علوم اداری دانشگاه سیستان و بلوچستان.
خاکی، غلامرضا(۱۳۷۹). “روش تحقیق در مدریت” . تهران: دانشگاه آزاد اسلامی.
خاکی، غلامرضا (۱۳۸۶)." روش تحقیق با رویکردی به پایان نامه نویسی“. چاپ سوم ، تهران: انتشارات بازتاب.
دسلر ، گری (۱۳۶۸). “مبانی مدیریت” . ترجمه : داوود مدنی ،جلد دوم، چاپ اول، تهران: انتشارات آرین.
دلاور، علی. (۱۳۷۸)." مبانی نظری و عملی پژوهش در علوم انسانی و اجتماعی“. چاپ اول ، تهران: انتشارات رشد.
رحمتی، زهرا (۱۳۸۴). “برسی رابطه سبک تفکر مدیران و جو سازمانی با بهره وری کارکنان ادارات آموزش و پرورش شهر تهران ". پایان نامه کارشناسی ارشد . دانشکده علوم اجتماعی دانشگاه آزاد اسلامی واحد رودهن .
رضائیان،علی(۱۳۸۴). “مبانی سازمان و مدیریت” . تهران : انتشارات سازمان مطالعه و تدوین کتب علوم انسانی دانشگاه ها .
رضایی دولت آبادی،حسن (۱۳۷۲). “بررسی رابطه بین جو سازمانی و رضایت شغلی کارکنان شرکت ذوب آهن اصفهان“. ﭘایان نامه کارشناسی ارشد . دانشکده علوم اداری و اقتصاد دانشگاه اصفهان .
رنجبر، ابوالفضل (۱۳۸۷). “ بررسی رابطه بین جو سازمانی و رضایت شغلی کارکنان اداره کل تامین اجتماعی استان قم ” . پایان نامه کارشناسی ارشد . دانشکده مدیریت دانشگاه تهران ﭘردیس قم .
ساده، مهدی (۱۳۷۵) ." روش های تحقیق با تاکیدی بر جنبه های کاربردی“. تهران: انتشارات مولف .
ساروخانی، باقر (۱۳۷۵) ." روش های تحقیق در علوم اجتماعی” . جلد اول، چاپ سوم ،تهران: پژوهشکده علوم انسانی و مطالعات فرهنگی.
سروری،آناهیتا (۱۳۸۱). “بررسی رابطه اجتماعی و سبک تفکر دانش آموزان دوره متوسطه منطقه ۱۰ شهر تهران” . پایان نامه کارشناسی ارشد. دانشکده روانشناسی و علوم اجتماعی دانشگاه آزاد واحد تهران مرکزی.
ژل در ظرف درب دار در حجم۱۰۰ میلی لیتر محلول رنگ ۱-۲ ساعت روی شیکر قرار گرفت. سپس محلول تخلیه و ژل با آب مقطر شستشو داده شده و محلول رنگبر اضافه گردید و روی شیکر قرار گرفت.این عمل چند بار انجام شد تا زمینه شفاف و باندها ظاهر گردیدند.
۳-۱۶- وسترن بلاتینگ
در این روش باند های پروتئینی از ژل به غشایی مانند نیتروسلولز منتقل می گردد که قابلیت اتصال و تثبیت پروتئین ها را دارد. برای تشخیص پروتئین های متصل شده به غشا از آنتی بادیها استفاده می گردد.امروزه وسترن بلاتینگ به طور گسترده در تحقیقات و تشخیص به کار می رود.انتقال پروتئینها توسط نیروی الکتریکی در تانک الکتروفورز یا به روش نیمه خشک انجام میگیرد.
در این پژوهش به منظور تایید ایمونوژیسیته نمونه HPV واکسن کاندید چند اپی توپی از روش وسترن بلات با انتقال در تانک استفاده شد.
۳-۱۶-۱- انتقال در تانک
روش انتقال در تانک به طور معمول در بافر تریس-گلایسین انجام می گیرد. این بافر برای انتقال انواعی از پروتئین ها که به روش SDS-PAGE جدا شده اند،مناسب است.
مواد و وسایل مورد نیاز:
کاغذ نیتروسلولز
کاغذ واتمن ضخیم
تریس
گلایسین
متانول
آب مقطر
اسفنج
تانک انتقال و ضمائم
منبع نیرو
روش انتقال:
مقداری از بافر انتقال( تریس ۲۵ میلی مولار ،گلایسین ۱۹۲ میلی مولار و متانول ۱۵ درصد به حجم ۲ لیتر در آب مقطر) در ظرفی ریخته شد وژل پس از جدا نمودن بخش متراکم کننده، حداقل ۱۰ دقیقه در آن قرار گرفت . ورقه ای از غشا هم در بافر انتقال قرار گرفت. اسفنجها و کاغذ صافیهای خیس شده روی هم قرار گرفته و ژل هم به آنها اضافه شد. سپس کاغذ نیتروسلولز روی ژل قرار گرفته و کاغذ صافیها و اسفنج به مجموعه اضافه گشت. مجموعه در قالب پلاستیکی محکم شده ، در تانک پر شده با بافر قرار گرفته و در طی شب با ولتاژ ۲۰ ولت الکتروفورز گشت. غشا با روش رنگ آمیزی قابل برگشت پانسو-اس بررسی گردید تا از انتقال اطمینان حاصل گردد.
۳-۱۶-۲- مسدودسازی غشا
مناطق آزاد غشا پس از بلاتینگ باید مسدود شوند تا آنتی بادی نشان دار به صورت غیر اختصاصی به آن متصل نگردند و در تشخیص اختلال ایجاد کنند. به این منظور از BSA 1.5 درصد و TWEEN 20 0.05 درصد در بافر TBS استفاده شد. غشا ۱ ساعت در دمای اتاق روی شیکر در این محلول مسدود گردید.
۳-۱۶-۳- تشخیص با آنتی بادی
پس از مسدودسازی غشا با آنتی بادی ها و اتصال اختصاصی آنها می توان باند مورد نظر را تشخیص داد. ابتدا آنتی بادی اولیه و سپس به آن آنتی بادی ثانویه کونژوگه با آنزیم متصل میشود و محل باند پس از اضافه کردن سوبسترا رنگی و مشخص می گردد.
مواد و وسایل مورد نیاز:
بافر TBS (تریس ۲۰ میلی مولار وکلریدسدیم ۱۵ مولار در آب مقطر)
بافر TBS-T (Tween20 0.05 درصد در TBS)
آنتی بادی اولیه (anti-Histag)
آنتی بادی ثانویه (آنتی موشی کونژوگه با پراکسیداز سیگما)
DAB (Sigma)
روش آزمایش:
پس از مسدود سازی ، غشا سه بار با TBS-T شسته شده و ۱ ساعت در آنتی بادی اولیه رقت (۱ به ۱۰۰۰) قرار گرفت.
در ادامه غشا ۴ بار شستشو گشته و ۱ ساعت در آنتی بادی ثانویه
(رقت ۱ به ۵۰۰۰( قرار داده شد. سپس ۴ بار شستشو داده شد و به مدت ۱۵ دقیقه در معرض TMB-Blotting قرار گرفت. بعد از ظهور باندها ، غشا با آب مقطر شستشو و پس از خشک شدن در محلی تاریک نگهداری شد.
۳-۱۷-تخلیص پروتئین با یون های نیکل متصل به ماتریکس NTA نوترکیب HPV واکسن کاندید چند اپی توپی روی ماتریکس Ni-NTA
از آنجا که پروتئین نوترکیب HPV واکسن کاندید چند اپی توپی با دنباله هیستیدینی بیان شده است،تخلیص پروتئین به روش کروماتوگرافی تمایلی انجام می شود.این روند براساس میل ترکیبی بخشی از پروتئین (در اینجا دنباله هیستیدینی) به یون های نیکل متصل به ماتریکس NTA طراحی شده است. در یک pH بهینه بهترین اتصال بین این دو اتفاق می افتدو بقیه پروتئین ها از ستون خارج می شوند. با شستشوی رزین با ماده ای که بتواند برای اتصال به ماتریکس با پروتئین مورد نظر رقابت کند اتصال پروتئین –ماتریکی سست شده و در نهایت پروتئین مذکور از ستون خارج می شود.شرایط کشت و القاء بیان ، بر روند تولید پروتئین نوترکیب موثر است و از این طریق مستقیما استراتژی به کار گرفته شده برای تخلیص پروتئین را تحت تاثیر قرار می دهد. از طرف دیگر مواردی همچون قدرت یونی pH و حضور یک ماده برای حذف پیوندهای غیر اختصاصی ، در برقراری اتصال بهینه پروتئین-رزین موثر است،لذا توصیه می شود قبل از تلخیص در مقیاس انبوه و جهت کسب شرایط بهینه ،ابتدا تخلیص در مقیاس اندک و به صورت تجربی انجام گیرد.
۳-۱۸-بهینه سازی تخلیص
همان گونه که اشاره شد جهت بهینه سازی تخلیص پروتئین HPV غلظت های مختلف ایمیدازول (در بافر لیز کننده)و pHهای مختلف بافرهای تخلیص ودر مقیاس اندک (روشbatch)بررسی گردید و بهترین شرایط برای به دست آوردن بیشترین میزان پروتئین نوترکیب محلول انتخاب شد.
۳-۱۹-ارزیابی پروتئین تخلیص شده با روش SDS-PAGE
برای ارزیابی پروتئین تخلیص شده از روشSDS-PAGE وتست برادفورد و اسپکتروفوتومتری بهره گرفته شد. پروتئینها در طول موج ۲۸۰ نانومتر جذب دارند بنایراین جذب نوری با این طول موج برای محلول پروتئین ما خوانده شد.
۳-۲۰-تخلیص انبوه پروتئین نوترکیبHPV واکسن کاندید چند اپی توپی
پس از به دست آمدن شرایط بهینه تخلیص، بیان پروتئین در مقیاس بالا انجام شد، سپس خروج پروتئین از سلول به کمک بافر لیزکننده (بافر اتصال حاوی لیزوزیم) و سونیکاتور انجام شد. پروتئین HPV که دارای دنباله هیستیدینی است با روش کروماتوگرافی تمایلی توسط رزین Ni-NTA تخلیص شد.
مواد و وسایل مورد نیاز:
رسوب جمع آوری شده از پروتئین بیان شده در مقیاس بالا
قرص مهارکننده پروتئاز (Protease inhibitor) بدون EDTA (Roche)
لیزوزیم استوک(۱۰mg/ml)
به این منظور ۱۰mg پودر لیزوزیم در ۱ml آب مقطر تزریقی حل و در ۲۰- درجه سانتی گراد نگهداری می شود.
*غلظت محلول کاری ۰٫۵-۱mg/ml استفاده می شود ،لذا بسته به میزان غلظت به کار رفته باید رقیق سازی محلول استوک در محیط واکنش را در نظر گرفت.
-
- بافر اتصال یا بافر تعادل pH=8 (برای ۵۰ میلی لیتر)
Tris-HCl (Merck) (20mM) 0.158 گرم
NaCl (0.5M)1.46 گرم
این ترکیبات را میتوان بر مبنای ساختمان شیمیایی یه صورت زیر تقسیم بندی کرد:
*ترکیبات آلی: ترکیبات آلی کلره، ترکیبات آلی فسفره، کارباماتها، آلی گوگرد دار(فنوبتازین، آرامیت)
*ترکیبات گیاهی: سموم پیرتروئید، پیرتروم، روتنون، نیکوتین
*ترکیبات معدنی: سرب آرسینات، سبزپاریس (مس آرسینات)، باریوم کربنات، اسید بوریک……
*حشره کشهای گازی
*سینرژیستها
*جونده کشها
*سایر موادی که به عنوان حشره کش مصرف میشوند
*سموم جدید(Lainsbury, 2014)
۱-۵-۴- تقسیم بندی سموم بر اساس نحوه ورود به داخل بدن
سموم گوارشی: به سمومی گفته می شود که از راه گوارشی وارد بدن آفت شده و پس از جذب از طریق دیواره لوله گوارش، سبب از بین رفتن آن میشوند. نظیر سموم آرسنیکی، ترکیبات فلوره، تالیم وروی. این سموم معمولا” علیه حشرات با قطعات دهانی ساینده به کار میروند.
۲-سموم تماسی: به سمومی گفته می شود که از طریق تماس جلد بدن، حشرات را تحت تأثیر قرار داده و سبب مرگ آنها میشوند. نظیر سموم معدنی، سموم گیاهی، روغنهای معدنی و گیاهی و ترکیبات مصنوعی کلره، فسفره، کارباماتی و غیره. تأثیر این سموم روی آفات با قطعات دهانی مکنده قابل توجه است، اما زمانی که آفت در داخل نسج گیاه باشد از تأثیر این سموم در امان خواهد بود.
۳-سموم گازی(تدخینی): به سمومی گفته می شود که به صورت بخار یا گاز از طریق دستگاه تنفس وارد بدن حشرات شده و سبب از بین رفتن آنها میشوند، نظیر گاز فسفین(Lainsbury, 2014).
۱-۵-۵- تقسیم بندی آفت کشها بر اساس طرز تأثیر
۱- سموم فیزیکی: عملکرد این سموم به صورت فیزیکی بوده و باعث مرگ حشره میشوندنظیر روغنهای سنگین معدنی که در اثر نفوذ به مجاری تنفسی و مسدود کردن آنها، باعث خفگی حشرات به ویژه شپشکهای نباتی میگردند. گردها نیز از جمله سمومی هستند که به طریق فیزیکی عمل میکنند. گردهای بی اثر به دو طریق باعث مرگ حشرات میشوند:
اول: برخی مانند اکسید آلومینیوم(Al2o3)باعث ایجاد شکاف و ترکهایی در جلد بدن حشره میگردد، در نتیجه، سبب بیرون رفتن آب از بدن و در نهایت مرگ حشرات میشوند.
دوم: برخی دیگر نظیر پودر تالک آب دوست بوده و از طریق جذب آب و چربی بدن، باعث مرگ حشره میشوند.
۲-سموم پروتوپلاسمی: این ترکیبات باعث می شوند که پروتئین سلولهای بدن حشرات رسوب کرده و درنتیجه زمینه مرگ آنها را فراهم میکنند، نظیر سموم جیوهای، مسی، املاح نیتروفنیل، نیترو کرزول، فلوسیلیکات، آرسنیت و آرسیناتها
۳-سموم تنفسی: این سموم با مهار کردن آنزیمهای اکسیداز که نقش اصلی را در تنفس سلولها بر عهده دارند، تنفس سلولها را متوقف نموده و باعث مرگ حشره میشوند و با عناصر فلزی موجود در آنزیمهای تنفسی و یا به عبارت دیگر با اکسیدازهای سلولی که دارای آهن هستند ترکیب شده و اثر کاتالیزوری آنها را خنثی میکنند، نظیر اسید سیانیدریک، هیدروژن سولفوره و گاز فسفین.
۴-سموم عصبی: این سموم بر روی آکسونها و یا انتقال دهندههای شیمیایی تحریکات عصبی که در محل سیناپسها قرار گرفته اند اثر کرده و بدین صورت باعث مرگ حشره میشوند. این ترکیبات از لحاظ نوع و نقطه اثر به چند دسته تقسیم میشوند :
الف) ترکیبات گیج کننده: ترکیباتی هستند که باعث ایجاد حالت خوابآلودگی و گیجی در موجودات تحت اثر خصوصا” پرندگان و پستانداران میشوند. از این گروه میتوان به ترکیباتی نظیر آنتراکینون(Anthraquinon)اشاره نمود که برای دور کردن پرندگان از مزارع به کار میرود. برخی ترکیبات هالوژنه نیز باعث ایجاد چنین حالتی میشوند.
ب)سموم آکسونی: این سموم بر آکسون سلولهای عصبی تأثیر میگذارد. سموم کلره و نیز پایروتیروئیدها به این صورت روی موجودات زنده خصوصا” حشرات مؤثرند.
ج) سموم سیناپسی: نقطه اثر این ترکیبات محل اتصال آکسون یک سلول عصبی به دندریت سلول عصبی دیگر یا در محل سیناپس میباشند. در سیناپسهای عصبی حشرات حداقل دو نوع انتقال دهنده شیمیایی به نامهای استیل کولین و اکتوپامین وجود دارد. در حشرات استیل کولین واسطه شیمیایی در سیستم عصبی مرکزی است اما در پستانداران این ناقل در محل اتصال اعصاب به سلولهای ماهیچهای عمل میکند. برخی از سموم نظیر ترکیبات فسفره و کاربامات بازدارنده آنزیم استیل کولین استراز میباشند. برخی نظیر فرمامیدینها بر سیناپسهای با واسطه اکتوپامین اثر میگذارند و برخی دیگر از سموم نظیر نیکوتین جزء سموم پس سیناپس به شمار می آیند.
۵-بازدارندههای متابولیکی:
۵-۱ مهار کنندههای زنجیره تنفسی: زنجیره انتقال الکترون در سلول شامل تعدادی از سیتوکرومها است که مانع تولید انرژی میشوند.از این گروه میتوان به ترکیباتی نظیر روتنون، اسید سیانیدریک و مونواکسیدکربن اشاره نمود.
۵-۲ بازدارندههای سیستم آنزیمی Mfo: سیستم Mfoیک سیستم اکسید کننده پیچیدهای است که در میکروزومهای کبدی پستانداران و بعضی بافتهای حشرات وجود دارد. بعضی ترکیبات شیمیایی از مشتقات متیلن دی اکسی فنیل مثل پی پرونیل بوتوکساید توانایی این را دارند که سیستم را در بدن حشره مهار کرده و از اکسیداسیون سم توسط این سیستم ممانعت به عمل آورند.
۵-۳ بازدارندههای چرخه اسید تری کربوکسیلیک(TCA) و گلیکولیز: تعدادی از سموم که غالبا” جزء ترکیبات معدنی می باشند با ممانعت از عمل آنزیمهای مختلف در چرخه تری کربوکسیلیک اسید یا چرخه کربس اختلال ایجاد کرده و در نتیجه باعث توقف اعمال متابولیکی می شوند. از این گروه میتوان به ترکیبات فلوئوره آلی از جمله فلوئورواستات سدیم و نیز برخی ترکیبات آرسنیکی اشاره نمود.
۶- سموم ماهیچهای: یون کلسیم در تحریک انقباضات عضلانی نقش مهمی دارد. برخی ترکیبات گیاهی مانند ریانودین و وراتریدین با تأثیر روی این یون و یا به صورت دیگر در بافت ماهیچهای اثر گذاشته و از انقباض آن جلوگیری میکنند. این ترکیبات باعث افزایش مصرف اکسیژن در بافت می شوند.
۷- ترکیبات آسکیله کننده: گروهی از ترکیبات شیمیایی از نظر بیولوژیکی فعال بوده و قادرند یک گروه آلکیل را جانشین اتم هیدروژن موجود در ترکیبات تحت اثر نمایند.این ترکیبات بر گروههای زیادی از ترکیبات شیمیایی مهم مانند پروتئینها، آنزیمها و اسیدهای نوکلئیک در بدن تأثیر گذاشته و ایجاد اختلال مینمایند. از این گروه میتوان برمتیل بروماید و برخی ترکیبات عقیم کننده نظیر آمینوپترین اشاره نمود(Engelen et al., 1998).
۱-۵-۶- رده بندی سموم بر اساس نوع مسمومیت
۱-رده بندی سموم بر اساس سمیت دهانی: گاهی سم از راه دهان وارد معده جانوران آزمایشگاهی یا موشهای صحرایی شده و آنها را تحت تأثیر قرار میدهد. از این لحاظ سموم را میتوان به صورت زیر تقسیم بندی نمود:
۱-۱ سموم پر قدرت:۵۰LDآنها mg/kg50 وزن بدن است. نظیر پاراتیون
۱-۲ مواد شدیدا” سمی: ۵۰LDآنها بین mg/kg200-50 وزن بدن است. نظیر دیازینون، دی کلرووس، دیمیتوات، دینوبوتون،هپتاکلر، متاسیستوکس و اندوسولفان
۱-۳ مواد با سمیت متوسط: ۵۰LDآنها بین mg/kg1000-200 وزن بدن است. نظیر کارباریل، دیکوفول، فنیتروتیون، فرمالین، مالاتیون، فوزامون، نیترافن، توکسافن، تری کلروفن و متالدهاید.
۱-۴ مواد با سمیت کم: ۵۰LDآنها بیشتر از mg/kg1000 وزن بدن است. نظیر بنومیل، محلول برموپروپیلات(نئورون)، میلبکس، تترادیفون و روغنهای صنعتی
۲-رده بندی سموم بر اساس سمیت پوستی:
در این نوع تقسیم بندی، سمیت سموم بر مبنای ورود آنها از طریق پوست ارزیابی میشود.
۲-۱ سمیت حاد: ۵۰LDآنها کمتر از g/kg300 وزن بدن بوده و ضریب سمیت پوستی دهانی کمتر از یک است.
۲-۲ قطعی: ۵۰LDآنها mg/kg1000-300 وزن بدن و ضریب سمیت پوستی دهانی ۳-۱ است.
۲-۳ نسبتا” کم: ۵۰LDآنها بیشتر از mg/kg1000 وزن بدن و ضریب سمیت تماسی گوارشی بیشتر از ۳ است.
ضریب پوستی دهانی عبارت است از نسبت ۵۰LDپوستی به ۵۰LDدهانی است. مثلا” اگر ۵۰LDپوستی سمی mg/kg300 و ۵۰LDدهانی آن mg/kg400 باشد، ضریب پوستی دهانی ۷۵/۰ میشود، یعنی این سم از طریق تماس ۷۵/۰ قابلیت مسمومیت دارد.
۳- رده بندی سموم بر اساس سمیت مزمن: ضریب تجمع عبارت است از نسبت متوسط دوز کشنده یک ماده شیمیایی در آزمایشات زیست سنجی(سمیت مزمن) به متوسط دوز کشنده در یک بار مصرف.
سموم بر اساس میزان تجمع سم در بدن ارزیابی میشوند:
۳-۱ سموم با خاصیت تجمعی بسیار شدید: ضریب تجمعی کمتر از یک است.
۳-۲ سموم دارای خاصیت تجمعی قطعی: ضریب تجمعی ۳-۱ میباشد.
۳-۳ سموم با خاصیت تجمعی متوسط: ضریب تجمعی ۵-۳ میباشد.
۴-۳ سموم با خاصیت تجمعی بسیار کم: ضریب تجمعی بیشتر از ۵ میباشد(DeWitt, 1956).
۱-۵-۷- طبقه بندی سموم بر اساس نحوه حرکت در گیاه
۱- سموم سیستمیک: این گروه بعد از پاشیده شدن روی سطح گیاه و یا خاک، به سرعت به داخل نسج گیاه نفوذ کرده و از طریق سیستم آوندی در کلیه اندامهای آن پخش میشوند و بدین ترتیب آفاتی را که از داخل یا خارج گیاه تغذیه میکنند تحت تأثیر قرار داده و از بین میبرند. ترکیبات این گروه هم دارای گروه چربی دوست و هم دارای باند آب دوست هستند و بدین ترتیب تا حد زیادی در آب حل میشوند. خاصیت چربی دوستی به آنها اجازه میدهد که از قشر مومی سطح برگ عبور کنند و خاصیت آب دوستی نیز سبب میشود که این ترکیبات در شیرهی گیاهی به جریان دربیاید. اکثر سموم فسفره در آوندهای چوبی حرکت میکنند. برخی از این سموم عبارتند از: هپتئفوس، فسفامیدون، پریمور و دیمتوات و…..
۲- سموم نفوذی یا نیمه سیستمیک: این ترکیبات در آب به مقدار کم قابل حل ولی در چربیها نسبتا” محلولاند. خاصیت چربی دوستی آنها سبب میشود که در لایه مومی سطح برگ نفوذ کنند اما در بافت گیاه به مقدار کمی پخش میشوند. به عبارت دیگر وقتی روی برگ سمپاشی میشود با نفوذ از ضخامت برگ، آفتی که در پشت برگ فعالیت میکند آن را تحت تأثیر قرار داده و از بین میبرد(خانجانی و پورمیرزا،۱۳۸۴). این سموم باید قبل از رسیدن به محل هدف فعال شده و معمولا” اکسید میشوند و این سموم معمولا” زمانی مصرف میشوند که دسترسی به آفت به دلیل پیچیده شدن شاخ و برگ به سادگی امکان پذیر نبوده و یا اینکه آفت در زیر پوست، برگ، میوه و یا شاخه چوبی پنهان شده باشد. این سموم در مورد آفاتی نظیر شتههای مومی تأثیر خوبی دارند. برخی از این ترکیبات عبارتند از: مالاتیون، پاراتیون، فنیتروتیون. مثلا” مالاتیون وقتی فعال میشود به مالاکسون، پاراتیون به پاراکسون و بالاخره سومیتیون به سومیواکسون تبدیل میشود(Altman et al., 1977).
۱-۵-۸- طبقه بندی سموم بر اساس میزان دوام و پایداری
۱-سموم با دوام بسیار زیاد: این سموم برای تجزیه شدن (معمولا” در خاک) و در واقع بیاثر شدن به زمانی بیش از دو سال نیاز دارند. به عبارت دیگر برای تجزیه ماده مؤثره حداقل دو سال زمان لازم است. د.د.ت، آلدرین، دی آلدرین و اغلب سموم کلره آلی متعلق به این گروه هستند.
۵-۷-۲-منابع لاتین ۹۸
فهرست جداول
عنوان………………………………………………………………………………………………………………………….صفحه
جدول(۲-۱) : تعاریف استراتژی……………………………………………………………………………………………………۲۰
جدول(۲-۲): ماتریس SWOT …………………………………………………………………………………………………….30
جدول(۳-۱): مشخصات گروه خبره………………………………………………………………………………………………۵۸
جدول (۳-۲): تناظر عبارات کلامی با مقادیر کلامی…………………………………………………………………………۶۱
جدول (۴-۱): عوامل بیرونی و درونی جهاد دانشگاهی استان سمنان………………………………………………….۶۹
جدول(۴-۲): ماتریس استراتژی های تدوین شده……………………………………………………………………………۷۰
جدول(۴-۳): استراتژی ها به تفکیک عوامل بحرانی و تعیین ماهیت………………………………………………….۷۱
جدول(۴-۴): عبارات کلامی………………………………………………………………………………………………………..۷۱
جدول(۴-۵): نظر خبره اول در خصوص میزان تاثیرات متقابل عوامل بحرانی موفقیت بر یکدیگر در نقشه استراتژی با متغیرهای کلامی…………………………………………………………………………………………………………۷۳
جدول(۴-۶): ماتریس سطوح ارتباطی اجزاء سازنده استراتژیها………………………………………………..۷۵
جدول(۴-۷): ماتریس سطوح ارتباطی اجزاء سازنده استراتژیها…………………………………………………۷۵
جدول(۴-۸): ماتریس سطوح ارتباطی اجزاء سازنده استراتژیها…………………………………………………۷۷
جدول(۴-۹): ماتریس ……………………………………………………………………..۷۷
جدول(۴-۱۰): ماتریس ………………………………………………………………….۷۷
جدول(۴-۱۱): ماتریس ……………………………………………………………………..۷۸
جدول(۴-۱۲): ماتریس شدت روابط غیر مستقیم: حد پایین ( )……………………………..۷۹
جدول(۴-۱۳): ماتریس شدت روابط غیر مستقیم: حد وسط ( )…………………………….۷۹
جدول(۴-۱۴): ماتریس شدت روابط غیر مستقیم: حد بالا ( )………………………………..۸۰
جدول(۴-۱۵): ماتریس شدت روابط مستقیم و غیر مستقیم مابین عوامل به صورت دیفازی شده………….۸۱
جدول(۴-۱۶): ماتریس شدت روابط غیرمستقیم مابین عوامل به صورت دیفازی شده………………………….۸۲
جدول(۴-۱۷): ماتریس شدت روابط مابین عوامل به صورت دیفازی شده………………………………………… ۸۳
جدول(۴-۱۸): تعیین سلسلهمراتب نفوذ عوامل و مناظر در نقشه استراتژی………………………………………..۸۴
فهرست نمودارها
عنوان………………………………………………………………………………………………………………………….صفحه
نمودار(۲-۱): تعامل بخش های سه گانه مدیریت استراتژیک…………………………………………………………….۲۱
نمودار (۲-۲): الگوی جامع مدیریت استراتژیک ……………………………………………………………………………..۲۲
نمودار(۲-۳): روش اول برای ترسیم نقشه استراتژی………………………………………………………………………..۴۵
نمودار(۲-۴): روش دوم برای ترسیم نقشه استراتژی………………………………………………………………………..۴۶
نمودار(۲-۵): روش سوم برای ترسیم نقشه استراتژی……………………………………………………………………….۴۷
نمودار(۲-۶): روش چهارم برای ترسیم نقشه استراتژی…………………………………………………………………….۴۷
نمودار(۲-۷): روش پنجم برای ترسیم نقشه استراتژی………………………………………………………………………۴۹
نمودار(۲-۸): مدل مفهومی تحقیق…………………………………………………………………………………………………۵۳
نمودار(۳-۱): نمایش عدد فازی مثلثی…………………………………………………………………………………………….۵۹
نمودار(۳-۲): اعداد فازی مثلثی برای متغیرهای کلامی……………………………………………………………………..۶۱
نمودار(۳-۳): روند اجرایی تحقیق………………………………………………………………………………………………….۶۵
نمودار(۴-۱): نقشه استراتژی جهاد دانشگاهی استان سمنان……………………………………………………………….۸۶
فهرست شکلها
عنوان………………………………………………………………………………………………………………………….صفحه
شکل(۲-۱) : چرخه عمر سازمان و جزئیات آن……………………………………………………………………………….۲۶
شکل (۲-۲): کارت امتیازی متوازن………………………………………………………………………………………………..۳۶
شکل(۲-۳): چشم انداز مالی…………………………………………………………………………………………………………۳۷
شکل (۲-۴): رابطه علت و معلولی بین کارت امتیازی متوازن……………………………………………………………۴۱
شکل)۲- ۵(: نقشه استراتژی جهاد دانشگاهی………………………………………………………………………………..۴۲